Monitoreo e identificación de la resistencia de Erysiphe necator a fungicidas QoI aislados de vid en la costa del Perú

Abstract

La oidiosis de la vid, causada por Erysiphe necator, es una enfermedad importante que afecta la producción de uvas en Perú. Para su manejo, se utilizan fungicidas como los QoI. Sin embargo, su uso excesivo puede generar resistencia debido a su mecanismo de acción específico. La mutación G143A en el gen del citocromo b, es la más frecuente en hongos fitopatógenos resistentes a fungicidas QoI, reportada en países como Estados Unidos, Canadá e India. Los objetivos de esta investigación fueron: Comparar dos protocolos de extracción de ADN para la detección de la mutación G143A y determinar su frecuencia en las regiones de Piura, Ica y la UNALM. Para este estudio, se colectaron 127 muestras de Piura (60), Ica (45) y la UNALM (22), utilizando estas últimas para la estandarización del método de extracción. Se seleccionó el protocolo de Chelex por su mayor concentración, rapidez y bajo costo. Del total, 102 muestras fueron confirmadas como E. necator mediante análisis filogenético. La detección de la mutación G143A mostró que el 100% de las muestras de Piura e Ica presentaban dicha mutación, mientras que las muestras de la UNALM no la presentaron. La electroforesis con primers específicos mostró que en todas las muestras de Piura e Ica se detectó una banda de 100 pb, confirmando la mutación G143A. En varios casos, se observó una banda tenue para el primer sensible, sugiriendo heteroplasmia y coexistencia de alelos resistentes y sensibles. Además, en Ica se encontró un mayor porcentaje de muestras heteroplásmicas que en Piura, posiblemente asociado a la menor aplicación de fungicidas QoI en esta región. Este estudio es el primer análisis de resistencia en E. necator en Perú, contribuyendo a comprender la prevalencia de la mutación G143A y proporcionando bases para estrategias más efectivas en el manejo de la oidiosis en el país.

Grape powdery mildew, caused by Erysiphe necator, is a significant disease affecting grape production in Peru. Fungicides such as QoIs are commonly used for its management; however, excessive use may lead to resistance due to their specific mode of action. The G143A mutation in the cytochrome b gene is the most frequent mutation found in QoIresistant phytopathogenic fungi and has been reported in countries such as the United States, Canada, and India. The objectives of this research were to: compare two DNA extraction protocols for the detection of the G143A mutation and determine its frequency in the regions of Piura, Ica, and UNALM. For this study, 127 samples were collected from Piura (60), Ica (45), and UNALM (22), with the latter used for standardizing the extraction method. The Chelex protocol was selected for its higher concentration, speed, and low cost. Of the total samples, 102 were confirmed as E. necator through phylogenetic analysis. Detection of the G143A mutation showed that 100% of the samples from Piura and Ica carried this mutation, while the samples from UNALM did not. Electrophoresis with specific primers indicated that all samples from Piura and Ica exhibited a 100 bp band, confirming the presence of the G143A mutation. In several cases, a faint band for the sensitive primer was also observed, suggesting heteroplasmy and the coexistence of resistant and sensitive alleles. Furthermore, a higher percentage of heteroplasmic samples was found in Ica compared to Piura, possibly associated with the lower application of QoI fungicides in this region. This study represents the first resistance analysis of E. necator in Peru, contributing to a better understanding of the prevalence of the G143A mutation and providing a foundation for more effective strategies in managing grape powdery mildew in the country